Существующие методы определения концентрации мочевой кислоты можно разделить на несколько групп:
1. Колориметрические — все эти методы недостаточно специфичны и основаны на:
- способности мочевой кислоты восстанавливать фосфорновольфрамовую и мышьяковомолибденовую кислоты, железосинеродистый калий;
- прямом фотометрическом определении концентрации мочевой кислоты по реакции Фолина‑Дениса;
- исследовании содержания по фенолгипохлоритной реакции.
2. Энзиматические — определение концентрации мочевой кислоты по расщеплению ее уриказой до аллантоина, СО2 и Н2О2. Результаты реакции учитываются:
- по количеству потребленного кислорода;
- регистрацией величины снижения абсорбции мочевой кислоты при 293 нм;
- определением образовавшейся перекиси водорода. Последняя при участии каталазы окисляет метанол до формальдегида, определяемого дополнительной реакцией;
- по флуоресценции образовавшихся продуктов после добавления флюорофора;
- с помощью потенциометрического электрода с иммобилизованной уриказой;
- образовавшаяся перекись водорода в присутствии каталазы вступает в реакцию с этанолом, образуется ацетальдегид, который восстанавливается НАДН, что сопровождается уменьшением светопоглощения при 340 нм.
Унифицированным методом является фосфорновольфрамовый метод.
Определение содержания мочевой кислоты в сыворотке крови фосфорновольфрамовым методом
Принцип
Мочевая кислота восстанавливает фосфорновольфрамовый реактив с образованием комплекса голубого цвета. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию в пробе мочевой кислоты.
Нормальные величины
| Сыворотка (указанный метод) | дети | 0,12‑0,32 ммоль/л |
| мужчины | 0,24‑0,50 ммоль/л | |
| женщины | 0,16‑0,44 ммоль/л | |
| Моча (с использованием уриказы) | 1,48‑4,43 ммоль/сут | |
| Желудочный сок | 47,6‑118,9 мкмоль/л | |
| Слюна | около 0,088 мкмоль/л |
Влияющие факторы
Пища, богатая пуринами; диуретики, салицилаты, кортикостероиды, лекарственные вещества — производные пурина, фенола, гемолиз.
Клинико‑диагностическое значение
Определение концентрации мочевой кислоты имеет особое значение для диагностики начальных стадий поражения почек и подагры.
Сыворотка
В крови выделяют два типа повышения содержания мочевой кислоты (гиперурикемии): первичную и вторичную.
Первичная гиперурикемия отмечается в связи с подагрой, связанной с увеличением эндогенного синтеза мочевой кислоты в результате нарушения обмена нуклеопротеидов, снижением содержания в плазме уратсвязывающего белка и замедлением выведения уратов с мочой. Также выявляется при синдроме Леша‑Нихана, при котором метаболиты распада пуринов превращаются в мочевую кислоту, а не используются повторно для синтеза нуклеотидов.
Вторичная гиперурикемия сопровождает почечную недостаточность, выявляется при поликистозе почек, гематологических заболеваниях, при злокачественных заболеваниях (лейкоз, лимфома, миеломная болезнь и другие диссеминированные опухолях), при сердечно‑сосудистых заболеваниях (гипертония, инфаркт миокарда, сердечная недостаточность), токсикозах беременности, синдроме Дауна, также встречается у больных эндокринными и обменными заболеваниями (диабет, гликогеноз I типа, гипо‑ и гиперпаратиреодизм, акромегалия, микседема), после применения лекарственных препаратов.
Гипоурикемия отмечается при лимфогранулематозе, миеломной болезни, гепатоцеребральной дистрофии (синдром Вильсона‑Коновалова), ксантинурии.
Моча
Увеличение содержания мочевой кислоты выявляется при подагре, лейкозах, вирусном гепатите, серповидноклеточной анемии, болезнь Вильсона‑Коновалова.
Снижение — при ксантурии, дефиците фолиевой кислоты, свинцовой интоксикации.